Производи

ЛецА (ПА-ИЛ) је цитотоксични лектин и адхезин који производи Псеудомонас аеругиноса који везује хидрофобне галактозиде са високом специфичношћу и афинитетом.Користећи лецА-егфп транслациону фузију и имуноблот анализу екстрацелуларног матрикса биофилма, показујемо да се лецА експримује у ћелијама које су узгајане у биофилму.У статичким тестовима биофилма и на полистирену и на нерђајућем челику, дубина биофилма и површинска покривеност смањени су мутацијом лецА и побољшани у соју ПАО-П47 који прекомерно производи ЛецА.Покривеност површине биофилма родитељским сојем, ПАО-П47, али не и лецА мутантом на челичним купонима, такође је инхибирана растом у присуству изопропил-бета-Д-тиогалактозида (ИПТГ) или п-нитрофенил-алфа-Д-галактозида ( НПГ).Штавише, зрели биофилми дивљег типа формирани у одсуству ових хидрофобних галактозида могу се дисперговати додатком ИПТГ.Насупрот томе, додавање п-нитрофенил-алфа-Л-фукозе (НПФ) која има висок афинитет према лектини П. аеругиноса ЛецБ (ПА-ИИЛ) није имало утицаја на формирање или дисперзију биофилма.Планктонски раст П. аеругиноса ПАО1 није био под утицајем присуства ИПТГ, НПГ или НПФ, нити је сој био у стању да искористи ове шећере као изворе угљеника, што сугерише да су уочени ефекти на формирање биофилма последица компетитивне инхибиције ЛецА-лиганда везивање.Слични резултати су такође добијени за биофилмове узгајане у условима динамичког протока на челичним купонима, што сугерише да ЛецА доприноси архитектури биофилма П. аеругиноса у различитим условима животне средине.

Алфа-Л-фукозидаза (ЕЦ 3.2.1.51) способна да ослободи т-фукозилни остатак из бочног ланца ксилоглуканских олигосахарида откривена је у листовима биљака Арабидопсис.Штавише, алфа-Л-фукозидаза са сличном специфичношћу супстрата је пречишћена из листова купуса (Брассица олерацеа) да би се добила једна трака на СДС-ПАГЕ.Две пептидне секвенце су добијене из ове протеинске траке и коришћене су за идентификацију гена Арабидопсис који кодира за алфа-фукозидазу коју предлажемо да назовемо АтФКСГ1.Поред тога, пронађен је и ген Арабидопсис са хомологијом са познатим алфа-Л-фукозидазама, а ми смо предложили да га назовемо као АтФУЦ1.И АтФКСГ1 и АТФУЦ1 су хетерологно експримирани у ћелијама Пицхиа пасторис и активности алфа-Л-фукозидазе излучене у медијум културе.Алфа-Л-фукозидаза коју кодира АтФКСГ1 била је активна против олигосахарида из ксилоглукана КСКСФГ, као и против 2'-фукозил-лактитола, али не и против п-нитрофенил-алфа-Л-фукопиранозида.Међутим, хетерологно експримиран АтФУЦ1 био је активан само против 2'-фукозил-лактитола.Дакле, прво мора бити повезано са метаболизмом ксилоглукана.