Производи

Развили смо нови систем испоруке мале интерферирајуће РНК (сиРНА) користећи тернарни комплекс са полиетиленимином (ПЕИ) и γ-полиглутаминском киселином (γ-ПГА), који је показао ефекат утишавања и није имао цитотоксичност.Бинарни комплекси сиРНА са ПЕИ били су приближно 73-102 нм у величини честица и 45-52 мВ у ζ-потенцијалу.Ефекат утишавања сиРНА/ПЕИ комплекса се повећао са повећањем ПЕИ, а сиРНА/ПЕИ комплекси са односом наелектрисања већим од 16 показали су значајно срушење луциферазе у ћелијској линији карцинома дебелог црева миша која редовно експримира луциферазу (Цолон26/Луц ћелије).Међутим, јака цитотоксичност и аглутинација крви примећени су у комплексу сиРНА/Липофецтамине и комплексу сиРНА/ПЕИ16.Извештава се да је пуњење катјонских комплекса ањонским једињењем обећавајући метод за превазилажење ових токсичности.Стога смо припремили тернарне комплексе сиРНА са ПЕИ (однос напуњености 16) додавањем γ-ПГА да бисмо смањили цитотоксичност и испоручили сиРНА.Као што се очекивало, цитотоксичност тернарних комплекса се смањивала са повећањем садржаја γ-ПГА, што је смањило ζ-потенцијал комплекса.Снажан ефекат утишавања упоредив са комплексом сиРНА/Липофецтамине откривен је у тернарним комплексима укључујући γ-ПГА са ањонским површинским набојем.Висока инкорпорација тернарних комплекса у ћелије Цолон26/Луц потврђена је флуоресцентном микрокопијом.Након што је постигнут нокдаун егзогено трансфектованог гена, процењена је способност комплекса да посредује у нокдауну ендогеног гена за одржавање домаћинства, глицералдехид 3-фосфат дехидрогеназе (ГАПДХ), у Б16-Ф10 ћелијама.Тернарни комплекс (сиРНА/ПЕИ16/γ-ПГА12 комплекс) показао је значајан ефекат обарања ГАПДХ.Тако смо развили користан систем испоруке сиРНА.