Производи

Нуклеарна акумулација мутантног облика нуклеарног протеина Ламин-А, названог Прогерин (ПГ) или Ламин АΔ50, јавља се у Хутцхинсон-Гилфордовом синдрому прогерије (ХГПС) или прогерији, болести убрзаног старења.Један од главних симптома овог генетског поремећаја је губитак поткожне масти због драматичне липодистрофије. Стабилно смо индуковали експресију хуманог ПГ и ГФП -зеленог флуоресцентног протеина- као контроле у ​​3Т3Л1 ћелијама користећи лентивирусни систем за проучавање ефекат експресије ПГ на капацитет диференцијације ове ћелијске линије, једног од најчешће коришћених адипогених модела.Квантитативна протеомика (иТРАК) је урађена да би се проучавао ефекат акумулације ПГ.Неколико модулисаних протеина је потврђено имуноблотингом и ПЦР-ом у реалном времену.Митохондријална функција је анализирана мерењем а) ​​базалне активности митохондрија, б) производње супероксид ањона и ц) индивидуалне ефикасности различитог комплекса респираторног ланца. Открили смо да прекомерна експресија ПГ испоруком лентивирусног гена доводи до смањење брзине пролиферације и недостатака у адипогеном капацитету у поређењу са контролом.Квантитативна протеомичка анализа показала је да је 181 протеин значајно (п<0,05) модулисан у преадипоцитима који експримирају ПГ.Функција митохондрија је поремећена у ћелијама које експримирају ПГ.Конкретно, открили смо повећање активности комплекса И и прекомерну производњу супероксидног ањона.Инкубација са агенсима за хватање реактивних врста кисеоника (РОС) доводи до смањења аутофагне протеолизе као што је откривено односом ЛЦ3-ИИ/ЛЦ3-И. ПГ експресија у 3Т3Л1 ћелијама промовише промене у неколико биолошких процеса, укључујући структуру цитоскелета, метаболизам липида, калцијум регулација, транслација, савијање протеина и стварање енергије од стране митохондрија.Наши подаци јачају допринос акумулације РОС фенотипу превременог старења и успостављају везу између митохондријалне дисфункције и губитка протеостазе у ХГПС.