Производи

Диференцијација орбиталних фибробласта у зреле адипоците и накнадна акумулација масног ткива приказана је у прогресији Гравесове орбитопатије (ГО).Аутофагија је укључена у адипогенезу, али се мало зна о улози аутофагије у иницијацији и напредовању ГО.Циљ овог рада је да се испита улога аутофагије у патогенези ГО. Анализирани су експланти орбиталног масног/везивног ткива пацијената са ГО и нормалних испитаника, као и изоловани орбитални фибробласти.Адипогенеза је индукована коришћењем диференцирајућег медијума са или без водоник пероксида, а аутофагијом се манипулисало коришћењем бафиломицина А1 и Атг5 циљане кратке РНК укоснице (схРНА).Аутофагозоми су идентификовани електронским микроскопом.Експресија гена повезаних са аутофагијом и транскрипциони фактори повезани са адипогенезом анализирани су ланчаном реакцијом полимеразе у реалном времену и/или Вестерн блот анализом.Акумулација капљица липида је испитивана бојењем Оил Ред О. Аутофагне вакуоле су биле заступљеније у ГО ћелијама него у не-ГО ћелијама (п<0,05).Експресија гена повезаних са аутофагијом била је значајно већа у ГО ткивима и ћелијама него у њиховим не-ГО колегама, респективно.Интерлеукин-1β је повећао ЛЦ3-ИИ, п62 и Атг7 протеин у ГО ћелијама.Акумулација аутофагозома је приказана 4. дана адипогенезе и смањена до 10. дана, заједно са формирањем липидних капљица.Експресија ЛЦ3 и п62 протеина се повећала у року од 48 сати од диференцијације и постепено се смањивала од 4. до 10. дана. Третман бафиломицином А1 и уништавање Атг5 схРНА су инхибирали акумулацију липидних капљица и потиснули експресију адипогених маркера. Аутофагија је повећана у ГО ткиву и ћелијама у поређењу са не-ГО ткиво и ћелије, што сугерише да аутофагија игра улогу у патогенези ГО.Манипулација аутофагијом може бити терапеутска мета за ГО.