Производи

Преко 70% глиома ниског степена има хетерозиготну мутацију Р132Х у гену који кодира изоцитрат дехидрогеназу 1 (ИДХ1).Ово даје ензиму нову способност да конвертује α-кетоглутарат у 2-хидроксиглутарат, што на крају доводи до туморигенезе.Главни извор производње 2-хидроксиглутарата је глутамин, који је код рака такође извор анаплерозе циклуса трикарбоксилне киселине (ТЦА).Алтернативни извор анаплерозе је флукс пирувата преко пируват карбоксилазе (ПЦ), што је уобичајен пут у нормалним астроцитима.Циљ ове студије био је да се утврди да ли ПЦ служи као извор ТЦА анаплерозе у ИДХ1 мутантним ћелијама у којима се глутамин користи за производњу 2-хидроксиглутарата. Истражени су имортализовани нормални хумани астроцити пројектовани да експримирају хетерозиготни мутант ИДХ1 или ИДХ1 дивљег типа.Ток пирувата преко ПЦ и преко пируват дехидрогеназе (ПДХ) је одређен коришћењем спектроскопије магнетне резонанце да би се испитало обележавање [2-¹³Ц]глутамата и глутамина изведене из глукозе ¹³Ц-лабе.Тестови активности, РТ-ПЦР и вестерн блоттинг су коришћени за испитивање експресије и активности релевантних ензима.Подаци Атласа генома рака (ТЦГА) су анализирани да би се проценила експресија ензима у узорцима хуманог глиома. У поређењу са ћелијама дивљег типа, мутантне ИДХ1 ћелије су значајно повећале фракциони проток кроз ПЦ.Ово је било повезано са значајним повећањем ПЦ активности и експресије.Истовремено, активност ПДХ се значајно смањила, вероватно посредована значајно повећаном инхибиторном фосфорилацијом ПДХ ПДХ киназом 3. У складу са посматрањем у ћелијама, анализа ТЦГА података је показала значајно повећање експресије ПЦ у узорцима хуманог глиома који експримирају мутантни ИДХ у поређењу са дивљим тип ИДХ. Наши налази сугеришу да промене у ПЦ и ПДХ могу бити важан део ћелијске адаптације на ИДХ1 мутацију и могу послужити као потенцијални терапеутски циљеви.